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济南大学学报(自然科学版)2025年第03期:肼解法的改进及在测定多肽链碳末端氨基酸的应用

来源:期刊VIP网 时间:


作者:韩文玉;李凯;魏旭;李宝瑞;王元秀;

单位:济南大学生物科学与技术学院;山东福牌阿胶股份有限公司;山东省农业科学院;

摘要:为了解决传统肼解法操作过程中碳末端氨基酸难以分离的问题,基于传统肼解法提出一种改进的方法测定碳末端氨基酸。采用水合肼肼解不同水解度的酪蛋白酶解液,分别利用庚醛和苯甲醛去除氨基酸酰肼,通过薄层层析法、高效液相色谱法测定2种方法获得的碳末端氨基酸并进行t检验。结果表明:采用庚醛和苯甲醛去除氨基酸酰肼得到的碳末端氨基酸溶液中均含有赖氨酸、鸟氨酸,氨基酸含量随着水解度的增大而增加,而且不同方法得到的赖氨酸、鸟氨酸含量无显著性差异(p>0.05),验证了改进肼解法的可行性,确定胰蛋白酶对酪蛋白中精氨酸、赖氨酸具有定向酶解作用。

关键词:肼解法;;酪蛋白;;碳末端氨基酸;;胰蛋白酶;;定向酶解

基金资助:山东省重点研发计划项目(2022CXGC010602)