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作者:魏攀;
单位:中国烟草总公司郑州烟草研究院;
摘要:【背景】氨基酸是植物体内非常重要的有机氮化合物,氨基酸转运蛋白参与了植物中氨基酸的转运,对植物的生长发育起着重要作用。【方法】为深入研究烟草氨基酸通透酶(Amino acid permease, AAPs)基因家族成员AAP3的功能,从普通烟草红花大金元中克隆NtAAP3基因,检测其在普通烟草不同发育时期和器官中的表达差异;创制该基因敲除纯合突变体,统计突变体大田农艺性状,检测突变体中氨基酸、蛋白质和色素含量,分析突变体在正常光照和强光胁迫条件下的光合指数变化。【结果】NtAAP3基因编码区(CDS)全长为1440 bp,在叶片中高表达,尤其是旺长期和打顶期;与对照组相比,NtAAP3基因敲除纯合突变体的自然株高和打顶株高有所降低,最大腰叶长/宽无明显变化;烤后烟叶的总蛋白质含量降低,其中脯氨酸和天冬酰胺的含量下降尤为显著;叶绿素a/b、总叶绿素和类胡萝卜素含量均有所升高;正常光照条件下的最大光化学效率(Fv/Fm)值无明显变化、非光化学淬灭(NPQ)值有所上升,而强光胁迫条件下的Fv/Fm和NPQ值均显著下降。【结论】NtAAP3基因突变导致烟草中氨基酸转运和蛋白质积累的效率降低,烟叶的色素含量、光合效率以及总产量未受影响,为烟草相关性状的品种改良提供了新的研究方向。
关键词:氨基酸转运;;氨基酸通透酶;;实时荧光定量PCR;;基因编辑;;光合指数;;普通烟草
基金资助:豫中烟区低氯高钾新品系试验示范与工业应用(D2020186);; 中国烟草总公司烟草基因组计划重大专项项目“低烟气苯酚释放量的云烟87、K326、红花大金元定向改良”[110201901019(JY–06)]