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作者:张钰静;杜易静;李琪伟;韩知彤;王莉;杜国强;师校欣;
单位:河北农业大学园艺学院;
摘要:【目的】探究葡萄试管苗通过离体叶片器官再生途径(不定芽直接再生/愈伤组织继代再生)脱除病毒的可行性,并优化再生培养基配方,为葡萄无病毒苗木的培育提供理论与技术支撑。【方法】以感染葡萄茎痘相关病毒(GRSPaV)的红斯威特葡萄和携带葡萄病毒E(GVE)、葡萄蚕豆萎蔫病毒(GFabV)及GRSPaV的阳光玫瑰葡萄试管苗为材料,筛选细胞分裂素(TDZ/BA)与生长素(IAA/NAA)配比、硝普钠(SNP)浓度及基本培养基类型,诱导离体叶片再生不定芽或愈伤组织;利用RT-PCR技术对再生植株进行病毒检测,分析脱毒效率。【结果】离体叶片再生的最适培养基:红斯威特葡萄为B_5+1.0 mg·L~(-1)TDZ+0.1 mg·L~(-1)IAA+15 g·L~(-1)葡萄糖+10 mg·L~(-1)SNP;阳光玫瑰葡萄为B_5+1.0 mg·L~(-1)TDZ+0.1 mg·L~(-1)IAA+15 g·L~(-1)葡萄糖+8 mg·L~(-1)SNP。红斯威特葡萄通过叶片直接再生不定芽,脱毒率达71.4%;阳光玫瑰葡萄经愈伤组织继代培养,至第3代完全脱除所有病毒,由其再生的植株经检测均为病毒阴性。【结论】在培养基中添加SNP可显著促进葡萄离体叶片不定芽再生。红斯威特葡萄适宜通过叶片直接再生途径进行脱毒,阳光玫瑰葡萄适宜通过愈伤组织继代再生途径进行脱毒,这两种途径均能获得无病毒原种。
关键词:葡萄;;试管苗;;离体叶片;;器官再生;;不定芽;;愈伤组织;;脱毒;;硝普钠(SNP)
基金资助:河北省现代农业产业技术体系葡萄创新团队建设专项资助(HBCT2023150201)