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作者：王铠露;李荣锋;马玉珍;刘松;邢荣娥;李鹏程;于华华;
单位：中国科学院海洋研究所;中国科学院大学;青岛科技大学;
摘要：沙海蜇(Nemopilema nomurai)作为东亚海域最具危害性的水母之一，其毒素中高丰度的磷脂酶A_2(PLA_2)同工酶被认为是引发系统性中毒反应的关键毒性成分。本研究基于转录组数据库，通过序列比对和三维结构模拟，筛选出四个具有典型PLA_2催化结构域的新型毒液蛋白。通过构建pET-22b和pET-32a异源表达系统，发现全长重组蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)体系中均呈现包涵体形式。为得到可溶性磷脂酶A_2,本研究创新性地采用多结构域截取策略，成功构建截短型PLA_2可溶性表达系统(pET-22b-PLA_2-3/BL21(DE3)),并进行体外活性检测证实其具有剂量依赖性磷脂水解活性。本研究首次建立了沙海蜇PLA_2毒素的可溶性异源表达体系，为深入阐明其毒性作用分子机制及开发特异性解毒剂奠定了基础。
关键词：磷脂酶A_2;;异源表达;;结构域截取;;水母毒素;;沙海蜇
基金资助：国家自然科学基金项目(41776163)资助~~
