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作者：刘鹿忆;何弯弯;朱泽亮;邓平;艾桃山;谢海侠;朱文欢;张立强;
单位：武汉市农业科学院;武汉中博水产生物技术有限公司;中国科学院水生生物研究所;武汉市水产技术推广指导中心;
摘要：为研究杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida)ETAE＿1309蛋白的表达调控机制，本实验利用序列截短方式和定点突变技术鉴定了ETAE＿1309基因的启动子，并检测了不同培养条件下启动子的活性。结果显示：ETAE＿1309上游-139～-1 bp具有启动子活性，ETAE＿1309的核心启动子为-10元件TATACT和-35元件CTGGCG,该启动子属于σ~(38)依赖型启动子。ETAE＿1309转录水平受到RpoS_(Ep)(σ~(38))强烈的正调控，与毒力相关的调控蛋白EsrB、EsrC和与生理过程相关的Fur、CpxR、ETAE＿2077对ETAE＿1309转录水平影响不大。当杀鱼爱德华氏菌在DMEM培养基中生长时，随着培养时间延长ETAE＿1309启动子活性逐渐增加，24 h(稳定期)和36 h(衰亡期)启动子活性分别为12 h(对数期)的2.4倍和2.9倍。当培养温度升高至35℃时ETAE＿1309启动子活性显著下降，约为25℃时启动子活性的44.0%。本研究确证了杀鱼爱德华氏菌ETAE＿1309的启动子序列及调控蛋白，随着培养时间延长该启动子活性逐渐增加，随着培养温度升高该启动子活性显著降低，研究结果为精准控制ETAE＿1309蛋白表达及其介导的细菌毒力奠定了基础。
关键词：ETAE＿1309;;启动子;;sigma因子;;转录调控;;杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida)
基金资助：武汉市农科院创新项目(QNCX202307);; 武汉市知识创新专项基础研究项目(2022020801010414)
