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作者：马聿田;李阳;李晓宇;其勒木格;吉林台;张文彦;希尼尼根;
单位：内蒙古农业大学兽医学院;鄂尔多斯市动物疫病预防控制中心;
摘要：为表达副结核分枝杆菌MAP3732c蛋白，研究构建原核表达质粒pET28a-MAP3732c，诱导表达鉴定后采用His标签亲和层析纯化获得MAP3732c重组蛋白，多次免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体，采用间接ELISA方法检测其抗体效价。结果表明，成功构建克隆重组质粒T1-MAP3732c与表达重组质粒p ET28a-MAP3732c；在IPTG终浓度为0.5 mmol·L~(-1)、37℃条件下成功诱导MAP3732c重组蛋白表达；SDS-PAGE结果表明，MAP3732c重组蛋白大小约为28 ku，且以包涵体形式存在；Western blot鉴定结果显示，重组蛋白与His抗体和牛源副结核病阳性血清均有良好免疫反应、阴性血清无非特异性结合；ELISA方法检测结果显示，抗MAP3732c多克隆抗体效价为1:204 800。研究为副结核分枝杆菌MAP3732c蛋白免疫原性分析及副结核病检测方法建立提供理论参考。
关键词：副结核分枝杆菌;;MAP3732c;;原核表达;;蛋白纯化;;多克隆抗体
基金资助：内蒙古自治区高等学校科学研究项目（NJZZ22490）;; 鄂尔多斯市科技重大专项项目（2022EEDSKJZDZX025）
