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畜牧与兽医2024年第03期:牛呼吸道合胞体病毒一步法实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

来源:期刊VIP网 时间:


作者:梁晓珊;宁鹏;李小龙;鲍显伟;李昊;石亚楠;王雪妍;郭雪莲;许立华;

单位:宁夏大学动物科技学院;

摘要:为建立一种牛呼吸道合胞体病毒(Bovine respiratory syncytial virus, BRSV)快速简便的检测方法,本研究基于BRSV M基因保守区序列,设计特异性引物及探针,通过优化反应条件,建立用于BRSV检测的一步法实时荧光定量PCR,并验证了该方法的敏感性、特异性和重复性;同时利用建立的检测方法对采集的临床样本进行检测。结果表明:本研究所建立的BRSV荧光定量检测方法,其特异性好,仅对BRSV存在特异性扩增;敏感性高,最低可达10 copies/μL;稳定性好,组内变异系数和组间变异系数小。使用所建立的BRSV一步法实时荧光定量PCR对宁夏地区94份临床样品进行检测,阳性率为5.3%(5/94)。上述结果表明,本研究建立的检测方法可为BRSV的快速诊断提供有力的技术支持。

关键词:牛呼吸道合胞体病毒;实时荧光定量PCR;M基因;诊断

基金资助:宁夏奶牛育种专项(2019NYYZ0503); 宁夏动物疫病净化科技创新团队项目(2020CXTDLX05)