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作者：蔡雅妮;范有鹏;杨忠华;韦俊宏;潘国庆;李春峰;
单位：西南大学资源昆虫高效养殖与利用全国重点实验室;西南大学微孢子虫感染与防控重庆市重点实验室;
摘要：由家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus, BmNPV)感染导致的家蚕血液型脓病给蚕桑产业造成巨大损失，然而BmNPV与宿主的互作机制至今仍然不明晰。前期的研究发现，BmNPC2可显著促进BmNPV感染，BmNPC2蛋白能够直接与BmNPV的囊膜蛋白GP64互作，敲除BmNPC2影响病毒粒子在晚期内体中的膜融合效率。为了鉴定BmNPC2蛋白与病毒囊膜蛋白GP64的互作关键位点，首先通过同源建模以及酵母双杂交试验，筛选出BmNPC2蛋白与囊膜蛋白GP64互作的2个关键区段。随后，将这两个区段位点的氨基酸进行逐个突变，酵母双杂交试验结果表明N95、D97、P105为关键互作位点。在敲除BmNPC2基因的BmE细胞中回补突变3个关键位点的BmNPC2蛋白后，细胞中BmNPV的病毒相对载量显著低于回补野生型BmNPC2蛋白组。以上结果表明，BmNPC2的这3个关键位点的突变显著减弱了BmNPV的感染能力，这些结果将为进一步解析BmNPV侵染家蚕的分子机制提供参考。
关键词：家蚕;;BmNPV;;BmNPC2;;GP64蛋白;;定点突变
基金资助：国家自然科学基金项目(32072793);; 重庆市现代农业产业技术体系专项(CQMAITS202311)
