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作者：王沙沙;何宁;晁岳恩;王刚;李艳;张伊欣;
单位：河南省农业科学院小麦研究所/河南省小麦生物学重点实验室;河南省农业科学院;焦作大学;北京市科学技术委员会;
摘要：高质量的酵母双杂交文库是筛选基因互作蛋白、研究基因调控机制的基础。本研究以优质小麦品种郑麦158为材料，取其扬花后7、14、21、28、35、42 d的籽粒等量混合，利用Gateway法构建酵母双杂交cDNA文库。结果显示，初级文库的库容量为8.0×10~6 CFU,酵母双杂交文库的库容量为9.4×10~6 CFU。随机挑取24个克隆进行菌液PCR检测，结果表明所有克隆均带有插入片段，插入片段的长度大多在700～2 000 bp之间，重组率均达到100%,插入片段符合预期大小。综上，本研究构建的郑麦158酵母双杂交cDNA文库质量较高，能够满足高效筛选互作蛋白的要求，可为筛选小麦品质相关基因的互作蛋白以及解析其调控机制奠定基础。
关键词：郑麦158;;优质小麦;;酵母双杂交;;cDNA文库
基金资助：河南省科技攻关项目(232102110220);; 河南省农业科学院自主创新项目(2024ZC001)
