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杂交水稻2024年第04期:水稻成熟种子总RNA提取方法的比较研究

来源:期刊VIP网 时间:


作者:廉添添;袁会峰;孙强;许园园;刘慧;

单位:新乡医学院三全学院生命科学技术学院;

摘要:采用PLANTeasy植物RNA提取试剂盒法(PLANTeasy法)、Trizol法、EASYspin植物RNA快速提取试剂盒法(EASYspin法)、 CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)-LiCl沉淀法、改良CTAB+过柱法等5种方法提取水稻成熟种子的总RNA,通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分析和安捷伦2100生物分析仪对总RNA样品进行质量与纯度检测,并以反转录PCR(RT-PCR)检测actin基因的目的条带,旨在明确获得水稻成熟种子高质量总RNA的最佳提取方法。结果显示,EASYspin法和改良CTAB+过柱法提取的总RNA样品的质量与纯度较高,以其提取的总RNA为模板并通过RT-PCR扩增均可获得明亮、单一的目的基因条带。尤其是改良CTAB+过柱法提取的总RNA产率高且完整性好,更适合水稻种子总RNA的提取。

关键词:水稻种子;;RNA提取;;改良CTAB+过柱法

基金资助:河南省科技攻关计划项目(222102310436);; 河南省高等学校重点科研项目(21B310008);; 新乡医学院三全学院科技创新团队(STD201704)