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作者：李娟娟;曾宪海;孔慧;
单位：深圳市龙岗区耳鼻咽喉医院耳鼻咽喉科;大连医科大学附属第二医院耳鼻咽喉科;
摘要：目的 分离提取和标记用于内耳治疗的外泌体。方法 原代培养人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cell,HUC-MSCs），使用超速离心法分离细胞上清外泌体，获得人脐带间充质干细胞外泌体（human umbilical cord mesenchymal stem cell derived exosomes,HUC-MSCs-exos），并对其进行荧光标记，最后进行HUC-MSCs-exos电镜、粒径、免疫蛋白印迹检测、RNA提取和表面蛋白阳性率检测。结果 提取的HUC-MSCs-exos边界清晰、球形、大小均一；纳米流式结果HUC-MSCs-exos颗粒浓度2.22×10~(10) Particles/mL，粒径大小81.97 nm；双辛可宁酸法测定HUC-MSCs-exos蛋白浓度0.36μg/μL;HUC-MSCs-exos有特征性膜蛋白TSG101、CD9、CD81、CD63和Syntenin表达；HUC-MSCs-exos的RNA浓度测定为1.5 ng/??L。结论 该实验方法可以成功提取用于内耳治疗的HUC-MSCs-exos。
关键词：内耳;;外泌体;;分离鉴定;;活性;;治疗
基金资助：深圳市医学重点学科建设项目（SZXK039）;; 深圳市龙岗区科技创新局医疗卫生技术攻关项目（LGKCYLWS2023003）
