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作者：罗淑敏;徐芳;路鹏鹏;王一越;李传云;李伟华;
单位：首都医科大学附属北京佑安医院北京市中西医结合传染病研究所;首都医科大学附属北京佑安医院北京肝病研究所;首都医科大学附属北京佑安医院外科中心;
摘要：目的 探讨培养时间对人单核细胞来源树突状细胞(DC)及其外泌体(DEX)免疫膜蛋白的影响。方法 采用重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)诱导人单核细胞分化成DC,并经肿瘤坏死因子α(TNF-α)促使其成熟；超速离心法分离DEX,透射电子显微镜及Amnis量化成像流式细胞术鉴定DEX并检测DC及DEX的免疫膜蛋白表达情况。结果 体外培养至第10天，DC表面即高表达CD11c、 CD80、 CD86、主要组织相容性复合体Ⅰ(MHC-Ⅰ)及MHC-Ⅱ分子，至第18天达峰值，表达率分别为CD11c(78.66±20.33)%、 CD80 (76.41±10.02)%、 CD86 (96.43±0.43)%、 MHC-Ⅰ(84.71±2.96)%、 MHC-Ⅱ(80.01±7.03)%,第24天后表达总体呈下降趋势(除CD80和MHC-Ⅱ外，差异均具有统计学意义);培养至第30天，仍有80%的DC表达CD80、 CD86、 MHC-Ⅱ分子。DEX表面免疫膜蛋白表达亦于第18天最高，随后随培养时间延长总体下降(除CD80外，差异均具有统计学意义)。相关性分析显示，DC与DEX表面的免疫膜蛋白表达水平呈显著正相关(CD11c:r=0.98;CD80:r=0.65;CD86:r=0.82;MHC-Ⅰ:r=0.86;MHC-Ⅱ:r=0.93)。结论 人单核细胞来源的DC在体外培养中可高效表达免疫膜蛋白，并在一定时间内保持稳定；其分泌的DEX表面同样高表达免疫膜蛋白，且二者表达变化趋势基本一致。
关键词：树突状细胞(DC);;外泌体;;免疫膜蛋白
基金资助：国家自然科学基金(82274447);; 北京市高层次公共卫生技术人才建设资助项目(2022-2-024);; 首都卫生发展科研专项(2024-2-1152);; 北京肝病研究所开放性项目(2025Y-KF-C02);; 内蒙古自治区人才开发基金高层次人才个人项目;; 北京市属医学科研院所公益发展改革试点项目(2019-6,2021-10)
