来源：期刊VIP网 时间：
作者：张月露;陶子琦;黄希;刘志洁;董译阳;周凌飞;黄梦卉;王芳;
单位：南京医科大学第一附属医院检验学部;南京医科大学第一附属医院国家医学检验临床医学研究中心分中心;
摘要：目的 探讨SRY-box转录因子4(SOX4)对CD4~+T细胞的分化以及氧化磷酸化(OXPHOS)代谢的影响。方法 磁珠分选健康人外周血来源的CD4~+T细胞，通过CD3和CD28抗体刺激2 d后，慢病毒感染CD4~+T细胞分别构建SOX4过表达(SOX4-OE)组和空载体(Vector)组，流式细胞术检测SOX4-OE组与Vector组CD4~+T细胞的表型分子[CD25、程序性死亡受体1(PD-1)、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)、糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)、肿瘤坏死因子受体超家族成员4(OX-40)]、转录因子叉头盒P3(FOXP3)、胞内细胞因子[转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞介素10(IL-10)、 γ干扰素(IFN-γ)、 IL-4、 IL-17A]以及OXPHOS相关指标[三磷酸腺苷(ATP)、活性氧(ROS)、线粒体活性氧(mtROS)、线粒体质量、线粒体呼吸链复合物]的变化；RNA测序分析SOX4-OE组与Vector组CD4~+T细胞的差异基因并进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)、基因本体论(GO)、基因集富集分析(GSEA)等富集分析。结果 与Vector组相比，SOX4-OE组CD4~+T细胞的活化表型分子CD25、 GITR和抑制表型分子CTLA-4、 PD-1表达比例显著增加，OX-40比例无显著差异，转录因子FOXP3表达比例显著增加；SOX4-OE组CD4~+T细胞的胞内细胞因子TGF-β1、 IFN-γ、 IL-17A比例显著高于Vector组，而IL-10比例显著低于Vector组，IL-4比例无显著差异；RNA测序分析SOX4-OE组与Vector组CD4~+T细胞的差异基因，通过KEGG通路分析得到OXPHOS通路显著富集；GO分析显示差异基因在免疫反应的调控、有氧电子传递链、正向调控TGF-β的产生等途径显著富集；GSEA富集分析得到相较于Vector组，SOX4-OE组CD4~+T细胞的TGF-β受体复合物介导的信号通路以及Sma和Mad相关蛋白2(SMAD2)/SMAD3:SMAD4异聚体转录活性上调；随着SOX4表达水平升高，CD4~+T细胞的ATP、线粒体呼吸链复合物水平显著升高，ROS、 mtROS水平显著降低，线粒体质量无显著差异。结论 SOX4促进CD4~+T细胞向类似于可塑性调节性T细胞(Treg)的状态分化，影响与Treg抑制功能密切相关的表型分子的表达，并且增强其氧化磷酸化代谢。
关键词：调节性T细胞(Treg);;SRY-box转录因子4(SOX4);;CD4~+T细胞;;氧化磷酸化(OXPHOS)
基金资助：国家自然科学基金(82273199);; 江苏省自然科学基金项目(BK20221417)
