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作者：蔡兴华;高洁;徐媛颖;张会会;买热艳木·肉孜;沙雯君;鲁郡;雷涛;
单位：安徽医科大学上海普陀中心临床学院;安徽医科大学第五临床医学院;上海中医药大学附属普陀医院内分泌科;
摘要：目的 探讨不同浓度支链氨基酸(BCAA)对3T3-L1前体脂肪细胞分化的作用及其机制。方法 将3T3-L1前体脂肪细胞分为空白对照(Control)组、分化介质(DM)组、低浓度BCAA组和高浓度BCAA组；CCK-8法检测不同浓度BCAA对前脂肪细胞存活率的影响；油红O染色观察各组脂肪细胞脂滴形成情况；酶法检测细胞内三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)含量；RT-qPCR和Western blot检测Stat3和脂肪细胞分化相关基因mRNA和蛋白表达情况。结果 CCK-8结果显示，当BCAA浓度≤10 mmol/L时，3T3-L1细胞的存活率不受BCAA的影响。与DM组相比，低浓度BCAA组(0.5、1.0 mmol/L)细胞内脂滴明显增大、脂滴数目明显增加，且细胞内TC(0.88 vs 0.68 mmol/g; 0.83 vs 0.68 mmol/g,P<0.01)和TG水平(0.77 vs 0.40 mmol/g; 0.62 vs 0.40 mmol/g,P<0.01)明显上升；而高浓度BCAA组(5.0、10.0 mmol/l)细胞分化较DM组明显下降。RT-qPCR和Western blot检测显示低浓度BCAA组PPARγ、C/EBPα、Adiponectin、FABP4的mRNA和蛋白表达均明显上升，而高浓度BCAA组上述基因表达均明显下降(P<0.01)。此外，低浓度BCAA促进Stat3磷酸化水平，而高浓度BCAA抑制其磷酸化水平(P<0.01)。结论 BCAA通过Stat3双向调控前脂肪细胞脂肪分化，即低浓度BCAA可通过促进Stat3磷酸化水平诱导其向成熟脂肪细胞分化；而高浓度BCAA则抑制Stat3磷酸化及细胞分化。
关键词：BCAA;3T3-L1;脂肪细胞分化;Stat3;脂肪生成;肥胖
基金资助：国家自然科学基金项目(编号：81774083); 上海市普陀区卫生健康系统临床特色专科建设项目(编号：2020tszk01); 上海市卫生健康委员会课题(编号：202240309); 上海市普陀区卫生健康系统科技创新项目(编号：ptkwws202003、ptkwws202302)~~
