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作者：刘苗苗;管美琪;余莲;杨小荣;王洁;李艳丽;
单位：山西医科大学第一医院神经内科;山西医科大学儿科医学系细胞生理学教育部重点实验室;山西医科大学生理学系细胞生理学教育部重点实验室;
摘要：目的 建立一种优化的方法，从老年大鼠脑组织中分离纯化小胶质细胞，并对小胶质细胞表面表型进行流式鉴定。方法 以年轻大鼠(3月龄)为对照，采用IV型胶原酶联合机械消化的方式制备老年大鼠脑组织单细胞悬液，用30%-37%-70%Percoll分离液分离纯化小胶质细胞，并对细胞进行荧光标记，通过流式细胞术检测老年大鼠脑组织的小胶质细胞表型。结果 采用IV型胶原酶联合机械消化，并结合密度梯度离心的方法，可以获得更多数量的单细胞，且细胞存活率均大于90%。流式检测结果显示：与年轻大鼠相比，老年大鼠脑组织M1型小胶质细胞表面标志物CD86和MHC II表达均增多(P<0.01),M2型小胶质细胞表面标志物CD200R表达也增多(P<0.01)。结论 采用IV型胶原酶联合机械消化，并结合密度梯度离心分离，是较好的分离纯化成年和老年大鼠脑组织小胶质细胞的方法。
关键词：衰老;神经炎症;小胶质细胞;分离纯化;流式细胞术;表面标志物
基金资助：国家自然科学基金项目(编号：82101641); 山西省基础研究计划项目(编号：20210302124173); 细胞生理学教育部重点实验室(山西医科大学)开放基金项目(编号：KLMEC/SXMU-202010)~~
