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作者：陈钰栋;李冰雨;许力;邢佳鑫;蒋佳芮;米其利;杨军;李雪梅;王中;高茜;
单位：云南中烟工业有限责任公司技术中心;中国烟草总公司郑州烟草研究院;
摘要：为探究ABA受体蛋白PYL在脱落酸（ABA）促进芸香苷合成过程中的作用，从栽培烟草基因组中克隆鉴定了NtPYL6基因，并进行了序列分析、表达模式检测、突变体创制及芸香苷含量检测。结果表明，NtPYL6参与了调控烟草中ABA诱导的芸香苷合成。栽培烟草基因组中有2个同源性较高的NtPYL6基因，分别命名为NtPYL6a和NtPYL6b，其编码蛋白具有典型的PYR＿PYL＿RCAR＿like结构域。基因表达水平分析显示，NtPYL6a和NtPYL6b在烟草茎和叶片中表现出较高的转录活性，且表达量受ABA、油菜素内酯（BL）、茉莉酸甲酯（MeJA）和1-氨基环丙烷羧酸（ACC）的显著诱导。序列分析发现，NtPYL6a基因上游1 393 bp启动子片段中含有多种激素相关的转录调控元件，能够启动上述激素诱导的该基因表达。利用Crispr/cas9创制了ntpyl6突变体，发现与野生型相比，ntpyl6突变体对ABA处理的敏感性降低，且ABA诱导的芸香苷合成在突变体中被显著抑制。同时，还发现ntpyl6突变体中ABA对芸香苷合成相关基因的诱导作用被显著抑制，而在NtPYL6a过表达材料中基因表达水平被显著上调。可见，NtPYL6在ABA促进烟草芸香苷合成过程中发挥着作用，可为烟草品质改良育种提供新的靶标基因。
关键词：烟草;脱落酸;PYL;芸香苷;基因表达
基金资助：云南中烟工业有限责任公司科技项目“5个重要基因编辑素材的基因功能研究及育种价值挖掘”（2022JY01）; 中国烟草总公司烟草基因组计划重大专项项目“多酚类物质代谢相关新品系配方适用性评价及育种应用”[110202201015(JY-15)]
