来源:期刊VIP网 时间:
作者:陈一兵;王雯蕾;张评浒;
单位:扬州大学动物实验中心;扬州大学医学院转化医学研究院;
摘要:旨在建立一种免疫酶测定方法,用于定量检测金黄色葡萄球菌肠毒素B。以金黄色葡萄球菌重组肠毒素B免疫BALB/c小鼠,制备鼠源单抗;筛选针对该毒素的配对单抗,构建双抗体夹心ELISA检测体系,在保证检测特异性基础上增加生物素/链霉亲和素放大系统,进一步提升敏感度。通过杂交瘤技术共获得6株针对重组B毒素的单抗克隆,其中由0085(捕获抗体)和0020(检测抗体)构建的双抗体夹心ELISA检测体系表现出良好的特异性,与肠毒素A、C、D、E均无交叉,对肠毒素B的检测敏感度可达0.625 ng/mL。增加生物素/链霉亲和素放大系统后敏感度可提升至0.156 ng/mL。本研究构建的检测方法具有高特异性及高敏感性,具有较强的应用前景。
关键词:金黄色葡萄球菌肠毒素B;单克隆抗体;双抗体夹心ELISA
基金资助:扬州大学高端创新人才计划(20180508)