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作者：吕世杰;张格阳;王香南;冯亚杰;乔智慧;祁兴山;张子敬;施巧婷;王二耀;
单位：河南省农业科学院畜牧研究所;神农种业实验室;泌阳县畜牧技术服务中心;
摘要：旨在筛选牛DNA聚合酶β(DNA polymerase β, POLB)基因核心启动子并对调控该基因表达的转录因子进行预测和鉴定。以牛POLB基因CDS区上游1 751 bp序列为模板，构建5个包含不同截短长度的启动子报告基因载体，利用双荧光素酶报告基因系统鉴定核心启动子，利用AnimalTFDB 3.0预测核心启动子结合转录因子，过表达转录因子后分析其对牛POLB基因的转录调控功能。结果：在牛肌肉原代细胞中，构建的5个截短的启动子报告基因载体均具有转录起始活性，pGL3-151(-151～-1 bp)和pGL3-1351(-1 351～-1 bp)的相对荧光素酶活性显著高于pGL3-551(-551～-1 bp)(P<0.001,P<0.000 1),表明-151～-1 bp和-1 351～-551 bp为牛POLB基因核心启动子区；AnimalTFDB 3.0预测核心启动子区存在转录因子特异性蛋白1(specificity protein 1, SP1)的结合位点；在牛肌肉原代细胞中过表达转录因子SP1,能够显著降低POLB基因的转录活性。本试验结果为进一步研究该基因表达调控机制提供参考。
关键词：牛;POLB基因;核心启动子;转录因子;SP1
基金资助：河南省重大科技专项(221100110200); 河南省中央引导地方科技发展资金项目(Z20221343039); 国家肉牛牦牛产业技术体系项目(CARS-37); 泌阳县国家现代农业产业园建设项目(05)
