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作者：任语馨;张杰;高雁怩;孙杨杨;张路捷;白娟;姜平;
单位：南京农业大学/农业农村部动物细菌学重点实验室;
摘要：猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行毒株存在多种基因亚型(谱系)和抗原性差异，为了鉴别不同谱系流行毒株，选取PRRSV谱系8毒株BB0907(高致病性毒株)非结构蛋白2(NSP2)高变区基因片段(tNSP2),采用大肠杆菌表达制备获得NSP2重组蛋白，并免疫BALB/c小鼠。结果：研制出5株NSP2单克隆抗体(3D6、6B2、6C3、8C2和8H6),小鼠腹水ELISA抗体效价均达1∶216 000;5株单抗轻链类型都为Kappa型，3D6、6B2和6C8的重链类型为IgG1,8C2的重链类型为IgG2b, 8H6重链类型为IgG2a;通过构建tNSP2蛋白截短体，Western blot鉴定出4个抗原表位，即~(485)GPLNFPTPSE~(494)、~(555)FPLAPSQNMG~(564)、~(575)EVLSEISDIL~(584)和~(585)NDTPAPVS~(593);间接免疫荧光试验结果显示，这些单抗均能与PRRSV谱系8毒株发生特异性反应，但与谱系1和谱系5毒株不反应。本研究为PRRSV分离毒株抗原鉴别诊断和生物学研究提供了有意义的研究材料。
关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒;Nsp2;单克隆抗体;B细胞表位
基金资助：江苏省自主创新研发基金项目(CX(22)1011); 国家生猪产业技术体系专项(CARS-35); 国家自然科学基金项目(32230103)
