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作者:常卫华;杨富贵;张桥桥;王娟红;倪国超;赵影;严光文;
单位:西昌学院动物科学学院;四川攀西动物疫病检测与防控实验室;四川地方特色山羊重点实验室;
摘要:旨在探讨长链非编码RNA(lncRNA)在绵羊妊娠早期中的调控作用,研究其对绵羊生殖生理的调控机制。通过高通量技术对不同生理时期绵羊卵巢进行转录组测序,结合生物信息学获得差异lncRNA;利用顺式(cis)和反式(trans)关系探讨差异lncRNA靶基因,对靶基因进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)研究lncRNA表达模式。结果:试验成功构建了绵羊妊娠早期RNA文库,每个样品平均产出11.50 G数据,并且每个样品与基因组平均比对率为93.88%;试验共检测到23 219个差异基因,其中mRNA 418个,lncRNA 49个(已知17个,候选32个);对49个差异lncRNA通过cis和trans关系分析获得341个靶基因;GO和KEGG通路研究表明,5个lncRNA(LOC105612389、BGIG9940_27655、RPS28、BGIG9940_27548和BGIG9940_27563)在妊娠期表达显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),均参与早期胎儿发育及相关调控过程;RT-qPCR结果表明,5个lncRNA基因表达量达到一定临界值时,预示该母羊已经妊娠。提示:5个lncRNA单独或联合使用有望作为早期妊娠检查的候选生物标志物,对绵羊早期妊娠诊断及提高经济效益具有十分重要的意义。
关键词:高通量测序;长链非编码RNA;生物标志物;妊娠
基金资助:国家自然基金地区项目(32360905); 中国农业大学对口支援西昌学院联合基金项目(ZXL202403); 2023年西昌市技术研究开发与推广项目[(2023)53-11)]