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作者：班万里;徐晶;刘帅;卡马力·吾力江;潘星羽;王冰洁;王延;塔力甫汗·古丽扎提;特列吾汗·穆尼拉;赵莉;张壮志;
单位：新疆畜牧科学院兽医研究所(新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心)/国家动物包虫病参考实验室;昌吉市动物疾病预防控制中心;伊犁哈萨克自治州动物疾病控制与诊断中心;
摘要：旨在建立敏感特异的犬细粒棘球绦虫(Eg)抗原ELISA检测方法。用细粒棘球绦虫表膜抗原(EgSfAg)免疫兔获得抗血清，同时利用抗EgSfAg杂交瘤细胞株4E8制备单抗，通过亲和层析获得纯化的多抗和单抗4E8,制备Eg、多房棘球绦虫、泡状带绦虫、多头绦虫和犬弓首蛔虫等5种蠕虫抗原作为特异性质控样品，利用单抗4E8进行Western blot检测，通过人工感染犬结合氢溴酸槟榔碱下泄法制备阳性对照样品，同时设置敏感性质控样品和阴性对照样品，构建样品盘，以多抗为捕捉抗体，HRP标记的单抗4E8为检测抗体，建立犬Eg抗原ELISA检测方法，并验证该方法的敏感性和特异性。结果：Western blot检测证明单抗4E8仅与EgSfAg有特异性反应；建立的ELISA检测方法最低检出量为1∶512;对130份阳性样品的平均检出率为95.38%;交叉试验结果显示仅EgSfAg结果为阳性；检测150份阴性样品的平均符合率为95.56%。综上，建立的ELISA方法具有较好敏感性和特异性，为终末宿主棘球蚴病的诊断和流行病学调查提供了一种安全、简便、高效的免疫学检测方法。
关键词：细粒棘球绦虫;抗原;单克隆抗体;ELISA;样品盘
基金资助：新疆维吾尔自治区自然科学基金项目(2022D01B18)
