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作者:刘永仕;吕茜;袁何玲;龚倩梅;王晓明;黄金虎;王丽平;
单位:南京农业大学动物医学院;
摘要:旨在探索硒代蛋氨酸羟基类似物(SeOH)缓解鸡肝癌细胞(LMH)氧化损伤的作用及潜在机制。建立H_2O_2氧化应激模型,通过检测细胞活力和细胞氧化/抗氧化指标的变化以及核转录因子E2相关因子2 (Nrf_2)通路和内质网应激关键分子的表达情况,评价不同浓度SeOH(16、32和64μg/mL)的抗氧化应激和内质网应激作用。结果显示:120μmol/L的H_2O_2刺激细胞24 h时,细胞活力显著下降(P<0.001),活性氧(ROS)的荧光强度升高。不同剂量的SeOH(16、32和64μg/mL)均可显著提高H_2O_2处理后的LMH细胞活力(P<0.01);32和64μg/mL的SeOH均可极显著提高LMH细胞的超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.01),显著降低丙二醛(MDA)含量(P<0.001)以及ROS的荧光强度。进一步研究显示32和64μg/mL的SeOH极显著上调Nrf_2蛋白(P<0.01)并显著上调谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白的表达水平(P<0.05),极显著下调Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)蛋白的表达水平(P<0.001),极显著增加Nrf_2的入核率(P<0.001);64μg/mL的SeOH可显著降低葡萄糖调节蛋白78(GRP78)(P<0.05)、蛋白激酶RNA样内质网激酶(PERK)(P<0.01)和转录激活因子4(ATF4)(P<0.001)的表达水平。提示:SeOH能通过激活Nrf_2通路并且抑制内质网应激缓解H_2O_2诱导的LMH细胞氧化应激,为畜禽养殖中SeOH作为抗氧化剂的应用提供理论基础。
关键词:SeOH;氧化应激;Nrf_2信号通路;内质网应激
基金资助:江苏省自主创新项目[CX(22)3039]; 江苏省研究生科研与实践创新计划项目(SJCX21_0239)