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畜牧与兽医2024年第05期:基于金纳米球的肠炎沙门菌SERS免疫层析快速检测技术

来源:期刊VIP网 时间:


作者:陈中婷;杨松鑫;张福鑫;蒙淑玲;陈海兰;郭隆华;江明生;王悦靓;

单位:广西大学动物科学技术学院;嘉兴学院生物与化学工程学院;广西壮族自治区兽用生物制品工程研究中心;广西畜禽繁育与疾病防控重点实验室;广西高校动物疫病预防与控制重点实验室;

摘要:为实现肠炎沙门菌的快速定量分析,采用Tris辅助柠檬酸钠还原法制备新型胶体金并利用Au-S配位作用在纳米金球表面修饰一层4-巯基苯甲酸(4-MBA)拉曼信号分子,然后以此为标记材料建立肠炎沙门菌表面增强拉曼(surface-enhancement of Raman scattering, SERS)免疫层析检测技术,并对其灵敏度、特异性和重复性进行考察。结果表明:建立的SERS免疫层析技术对肠炎沙门菌的可视化最低检测限(LOD)为10~6 CFU/mL,而通过拉曼信号检测时LOD为10~5 CFU/mL,灵敏度比裸眼观察提高了10倍。在10~5~10~8 CFU/mL的浓度范围可根据标准曲线y=30.23×exp(-x/-1.47)-215.83(R~2=0.995)对肠炎沙门菌进行定量分析。该SERS免疫层析技术与鼠伤寒沙门菌、鸡白痢沙门菌、甲型副伤寒沙门菌等多种血清型沙门菌和大肠杆菌、副溶血弧菌等常见病原无交叉反应,特异性良好。同一批次的不同试纸条和不同批次的试纸条对相同样品的检测结果基本一致,重复性良好。以粪便和鸡蛋壳为基质的加标试验回收率在94.7%~104.9%之间,回收率良好。结果表明,基于金纳米颗粒的肠炎沙门菌SERS免疫层析快速检测技术灵敏度较高,特异性强,重复性好,能弥补传统胶体金试纸条无法定量的不足,可用于肠炎沙门菌的快速定量检测。

关键词:肠炎沙门菌;免疫层析;胶体金;表面增强拉曼散射;快速检测

基金资助:巴马人才科技专项(巴人科20210017); 广西自然科学基金面上项目(2022GXNSFAA035562); 浙江省重点研发计划项目(Q20B050018)