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作者：李向军;李福欣;井维尧;刘翠;刘莉梅;张星华;张枫帆;陈平;杜小正;
单位：甘肃省中医院风湿骨病科;甘肃中医药大学针灸推拿学院;甘肃省中医院针灸科;
摘要：目的：观察热补针法对类风湿关节炎(RA)寒证家兔膝关节滑膜炎性反应及滑膜组织、血清中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、糖酵解活性的影响，探讨热补针法治疗RA的机制。方法：选取32只新西兰兔随机分为正常组、模型组、抑制剂组、热补针法组，每组8只。采用卵蛋白联合弗氏完全佐剂诱导及低温冷冻法复制RA寒证模型。抑制剂组给予2-甲氧基雌二醇腹腔注射，热补针法组给予热补针法针刺“足三里”，留针30 min。各组干预均1次/d，连续14 d。观察家兔膝关节周径及痛阈变化；采用ELISA法检测家兔血清中还原型辅酶Ⅱ(NADPH)、己糖激酶(HK2)、6-磷酸果糖激酶2/2,6-二磷酸果糖激酶3(PFKFB3)含量；HE染色法观察家兔膝关节滑膜组织形态变化；免疫组织化学法检测家兔膝关节滑膜组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-17的阳性表达；分光光度法检测家兔膝关节滑膜组织中乳酸含量；Western blot法检测膝关节滑膜组织中HIF-1α、乳酸脱氢酶(LDHA)、丙酮酸激酶2(PKM2)蛋白表达水平。结果：干预后，与正常组比较，模型组家兔膝关节周径增大(P<0.05)，痛阈值降低(P<0.05)，可见滑膜细胞中度增生及炎性浸润，滑膜组织病理评分升高(P<0.05)，滑膜组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-17阳性表达及乳酸含量均升高(P<0.05)，血清NADPH、HK2、PFKFB3含量及滑膜组织中HIF-1α、LDHA、PKM2蛋白表达水平均升高(P<0.05)。与模型组比较，抑制剂组及热补针法组家兔膝关节周径缩小(P<0.05)，痛阈值升高(P<0.05)，滑膜增生、炎性细胞浸润均改善，滑膜组织病理评分降低(P<0.05)，滑膜组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-17阳性表达及乳酸含量均下降(P<0.05)，血清NADPH、HK2、PFKFB3含量及滑膜组织中HIF-1α、LDHA、PKM2蛋白表达水平均下降(P<0.05)。与抑制剂组比较，热补针法组家兔滑膜组织病理评分升高(P<0.05)，滑膜组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-17阳性表达及乳酸含量均升高(P<0.05)，血清NADPH、HK2、PFKFB3含量及滑膜组织中HIF-1α、LDHA、PKM2蛋白表达水平均升高(P<0.05)。结论：热补针法干预RA寒证家兔可提高痛阈，减小膝关节周径，抑制炎性反应，其作用机制与下调HIF-1α及糖酵解活性相关。
关键词：类风湿关节炎;;热补针法;;糖酵解;;缺氧诱导因子1α;;炎性反应
基金资助：国家中医药管理局甘肃郑氏针法学术流派传承工作室项目（No.2305135901）;; 国家自然科学基金项目（No.82060891）;; 甘肃省科技计划项目（No.22JR11RA201）;; 甘肃省针灸推拿临床医学中心开放基金项目（No.ZJKF2203）
