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作者：朱钱;刘静玉;郝赛楠;王照弦;夏良君;沈洁;程洁;李茜;夏有兵;
单位：南京中医药大学针灸推拿学院·养生康复学院;南京中医药大学针药结合教育部重点实验室;徐州医科大学;
摘要：目的：观察电针预处理对促排卵大鼠子宫组织中时钟基因Bmal1表达节律的影响，探讨电针预处理提高促排卵大鼠植入期子宫内膜容受性的作用机制。方法：将72只雌性SD大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组和预电针组，每组24只。除正常组外，其余2组大鼠腹腔注射孕马血清促性腺激素48 h后腹腔注射人绒毛促性腺激素制备促排卵模型。预电针组选取“关元”“三阴交”，于造模前两个动情周期每日21:00电针干预，每次15 min，直至造模结束。正常组大鼠动情期与输精管结扎雄鼠合笼，其余两组造模结束当日合笼。3组大鼠于合笼成功后第5天4:00起每隔4 h每批每组4只进行取材，共分6批。HE染色观察子宫内膜厚度、腺体和血管数目及组织形态变化；ELISA法检测血清雌二醇（E2）与孕酮（Pg）含量；实时荧光定量PCR法检测子宫核心时钟基因Bmal1和子宫内膜容受性因子HoxA10、白血病抑制因子（LIF）的mRNA表达；Western blot法检测子宫组织HoxA10、LIF蛋白表达。结果：与正常组相比，模型组子宫内膜厚度变薄（P<0.01），腺体和血管的数量显著减少（P<0.01,P<0.05）；子宫Bmal1节律表达峰值和谷值的表达时点与正常组相反，12:00和16:00时Bmal1 mRNA表达下降（P<0.01）；血清E2、Pg含量显著提高（P<0.01,P<0.05）；内膜容受性因子HoxA10和LIF的mRNA和蛋白表达水平显著降低（P<0.01,P<0.05）。与模型组相比，预电针组子宫内膜厚度、腺体和血管的数量均显著增加（P<0.05）；子宫Bmal1节律表达的峰谷值回调，其表达水平也有所增加，其中12:00时3组的表达差异最为显著，12:00时预电针组Bmal1表达较模型组显著升高（P<0.05）；血清Pg含量显著降低（P<0.05）；容受性因子HoxA10和LIF的mRNA和蛋白水平升高（P<0.05,P<0.01）。结论：电针预处理能够改善种植窗口期子宫内膜容受性，其机制可能是调节子宫组织时钟基因Bmal1的节律表达，纠正促排导致的时钟基因表达的节律紊乱。
关键词：电针预处理;;控制性超排卵;;昼夜节律;;时钟基因;;Bmal1
基金资助：国家自然科学基金项目（No.82274638）
