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作者：刘欣悦;钱峰;
单位：上海交通大学药学院;
摘要：目的 探究敬钊缨毛蛛肽类毒素JZTX-V中的多肽片段对巨噬细胞炎症反应的抑制作用，并探究相关机制。方法 通过免疫印迹法检测来自JZTX-V的3个多肽片段对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)刺激的RAW 264.7细胞中诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)表达的作用；通过Griess反应检测细胞上清液中一氧化氮(nitric oxide, NO)浓度，通过异鲁米诺化学发光检测超氧化物的产生量；通过实时荧光定量PCR检测细胞中促炎细胞因子mRNA的表达量；通过免疫印迹法检测JZ-VF3对丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)和核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路的影响，并用免疫荧光检测JZ-VF3对p65的核转位的影响。结果 与LPS刺激组相比，用JZ-VF3处理RAW 264.7细胞可以显著抑制iNOS的激活及NO和超氧化物的产生，还可以抑制细胞中促炎细胞因子的产生。蛋白免疫印迹和免疫荧光实验揭示，JZ-VF3可以抑制MAPK和NF-κB信号通路的激活，以及p65的核转位。结论 JZTX-V中的JZ-VF3多肽片段通过抑制MAPK和NF-κB信号通路的激活，从而抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞中的炎症反应，具有成为多肽抗炎药的潜力。
关键词：敬钊缨毛蛛;炎症;巨噬细胞;MAPK信号通路;NF-κB信号通路
基金资助：国家自然科学基金项目(82373875)
