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作者：余思宸;彭晓丽;陈丽霞;蔡怡珊;黄恩炯;
单位：福州国际旅行卫生保健中心;福建医科大学公共卫生学院;三明海关综合技术服务中心;
摘要：【目的】研究AaPGRP-SC2在埃及伊蚊抵御Bti杀虫晶体蛋白Cry4Ba和Cry11Aa侵染中的功能，为研发新一代生物杀虫剂提供理论指导。【方法】采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术，分析埃及伊蚊4龄幼虫感染Bti杀虫晶体蛋白Cry4Ba和Cry11Aa后，不同时间点体内AaPGRP-SC2、抗菌肽基因及Toll通路和免疫缺陷(IMD)通路相关基因的表达情况。同时，在蚊虫体外原核表达AaPGRP-SC2,并采用SDS-PAGE结合Western blot检测纯化蛋白的质量；利用Far Western blot检测AaPGRP-SC2与Cry4Ba和Cry11Aa的结合情况。【结果】埃及伊蚊4龄幼虫感染Cry4Ba和Cry11Aa 2 h后，AaPGRP-SC2基因表达量与对照相比均显著上升，但在12 h后，Cry4Ba处理组的AaPGRP-SC2表达量下降，而Cry11Aa处理组的AaPGRP-SC2表达量继续升高。在Cry4Ba和Cry11Aa侵染2 h后，埃及伊蚊4个抗菌肽基因CecA、Att、Dipt和DefA以及Toll通路3个下游基因Spz2、Tube、Toll1A的表达量显著上升，但IMD通路下游基因中只有Cry4Ba处理组的Dredd和Cry11Aa处理组的Ankyrin1的表达量显著上升；12 h后，4个抗菌肽基因CecA、Att、Dipt和DefA以及Toll通路3个下游基因Spz2、Tube、Toll1A的表达量仍高于对照，而IMD通路下游基因中只有Cry11Aa处理组的Ankyrin1表达水平显著上调；不论侵染时间长短，IMD通路下游基因中Ankyrin2、Ankyrin3、Kenny和UevlA基因的表达量与对照相比均无显著差异。此外，成功表达了AaPGRP-SC2蛋白，并纯化得到Cry4Ba和Cry11Aa两个杀虫晶体蛋白；Far Western blot检测显示，AaPGRP-SC2可与Cry4Ba和Cry11Aa结合。【结论】AaPGRP-SC2可激活Toll通路并产生抗菌肽，但在调控IMD通路并产生抗菌肽的过程中基因表达变化不显著。
关键词：埃及伊蚊;;苏云金芽孢杆菌;;肽聚糖识别蛋白;;AaPGRP-SC2;;抗菌肽
基金资助：福建省对外合作项目(2022I0029)
