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作者：苏进博;王锦祥;殷光文;
单位：福建农林大学未来技术学院;福建省农业科学院畜牧兽医研究所;
摘要：【目的】建立兔源支气管败血波氏杆菌(Bb)的快速检测方法，用于兔波氏杆菌病的诊断。【方法】以Bb的fimX基因为靶基因，设计特异性引物并构建质粒标准品。在此基础上建立检测兔源Bb的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法，对该方法的特异性、敏感性和重复性进行评价，并将该方法初步应用于临床样品的检测。【结果】荧光定量PCR方法仅对兔源Bb的检测结果呈阳性，对其他常见兔源病原菌的检测结果均呈阴性；对质粒标准品的最低检测限为13.8拷贝·μL~(-1),敏感性是普通PCR方法的10倍；批内重复性试验的变异系数小于2%,批间重复性试验的变异系数小于3%;对68份临床样品进行检测，阳性检出率为39.71%,比普通PCR方法的高2.95%。【结论】建立的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法特异性强、敏感性高、重复性好，且对临床样品的阳性检出率比普通PCR方法高，为兔源Bb的快速检测和防控提供了技术支持。
关键词：兔;;兔波氏杆菌病;;支气管败血波氏杆菌;;荧光定量PCR方法;;检出率
基金资助：福建省科技计划公益类专项(2022R10260012);; 国家现代农业产业技术体系项目(CARS-43-G-5)
