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作者：崔垚鑫;李聃;谢佳芮;朱沛;徐心明;岩锐;陈其云;李文贵;姚俊;
单位：云南农业大学动物医学院;云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室;云南省大理市大理镇农业综合服务中心;云南省楚雄州禄丰市动物疫病预防控制中心;云南省普洱市孟连县动物疫病预防控制中心;玉溪农业职业技术学院动物科技学院;
摘要：为探明云南省牛病毒性腹泻黏膜病（BVD-MD）的发生、流行态势及其流行毒株的生物学特征，本试验于2022年12月—2023年11月从云南省10个州市规模化养牛场随机采集667份牛粪便样品，进行牛病毒性腹泻病毒（BVDV）逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测，针对阳性样品选用牛肾细胞（MDBK）进行毒株的分离和鉴定，结合间接免疫荧光试验（IFA）观察病毒增殖情况，并使用Reed-Muench法计算病毒滴度；阳性样品经全基因组测序后，分别对全基因组和5′非翻译区（5′-UTR）序列进行系统发育分析。结果显示，经RT-PCR和MDBK细胞分离鉴定获得2株BVDV，分别命名为BVDV YN. 1(GenBank登录号：PP488512.1)和BVDV YN. 2(GenBank登录号：PP770551.1)，病毒滴度分别为105.81和104.93 TCID50/mL。系统发育分析结果显示，2株BVDV分离株与美国分离的BVDV-1b亚型参考毒株HP-KY-RK13(GenBank登录号：KT355592.1)的核苷酸相似度分别为99.6%和99.5%，与日本分离的BVDV-1b亚型参考毒株END(GenBank登录号：JX419397.1)的核苷酸相似度均为99.7%，且处于同一进化分支（BVDV-1b亚型）。本试验可为云南省BVDV流行病学调查及对其防控提供理论参考依据。
关键词：牛病毒性腹泻病毒(BVDV);;BVDV-1b亚型;;云南;;分离和鉴定
基金资助：云南省科技厅乡村振兴科技专项-科技特派团（202304BI090003）;; 云南省科技厅重点研发计划（202303AK140031）;; 云南益民养殖示范基地有限公司姚俊专家基层科研工作站;; 澜沧重牧农业科技有限公司姚俊专家基层科研工作站
