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中国兽医杂志2025年第02期:嗜水气单胞菌纳米PCR检测方法的建立

来源:期刊VIP网 时间:


作者:韩雅静;赵奇;石有权;安瑞;赵云萍;史秋梅;吴同垒;高桂生;

单位:河北省预防兽医学重点实验室;滦州市农业农村局;迁西县农业农村局;

摘要:为了快速检测水生动物的嗜水气单胞菌(A. hydrophila)感染,本试验根据嗜水气单胞菌溶血素hlyA基因序列设计引物,通过对退火温度和引物体积的优化,建立了嗜水气单胞菌的纳米聚合酶链式反应(Nano-PCR)检测方法,分析其敏感性、特异性和临床样本检测结果,并与普通聚合酶链式反应(PCR)方法进行比较。结果显示,优化建立的纳米PCR方法成功扩增出约280 bp的嗜水气单胞菌特异性条带;最小检测浓度为1.61 pg,敏感性是普通PCR(最小检测浓度为16.1 pg)的10倍;纳米PCR和普通PCR方法对创伤弧菌(V. vulnificus)、迟缓爱德华菌(E. tarda)和维氏气单胞菌(A. veronii)均无扩增;对18份病料的阳性检出率为72%,与普通PCR结果一致。结果表明,本试验建立的检测嗜水气单胞菌的纳米PCR方法较普通PCR方法具有更高的敏感性和特异性,为水生动物嗜水气单胞菌感染的鉴别诊断和防治提供了技术支持。

关键词:嗜水气单胞菌;;纳米PCR;;hlyA;;临床检测

基金资助:河北省科技厅循环养殖鱼类技术的应用与示范(202867012);; 河北省第三期现代农业产业技术体系技术河北省创新团队建设项目(HBCT2023220207)