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作者：古丽孜巴·艾力;李伟建;艾力亚木·土尔衮;张慧;王旭光;
单位：新疆农业大学动物科学学院;
摘要：研究旨在建立以TaqMan荧光PCR为基础的快速检测绵羊X、Y精子比率的方法，为绵羊X、Y精子分离技术的发展与应用提供技术支撑。试验分别针对X、Y染色体特异性基因F9和SRY设计引物与探针，以绵羊基因组DNA为模板进行片段扩增、质粒连接、扩增提纯后按不同比率混合构建标准曲线，计算拟合方程。并通过对3份商用X、Y性控精液及2份鲜精进行测定来检验方法的准确性、稳定性及可靠性。结果表明，商用X性控精液中X精子的比率分别为（89.46±3.37）%、（89.86±2.85）%、（90.02±2.19）%，商用Y性控精液中Y精子的比率分别为（89.02±2.68）%、（88.21±2.63）%、（88.72±3.93）%，检测结果与质控报告所标注的X、Y精子比率无显著性差异（P <0.05）。鲜精的检测结果表明，X、Y精子比率分别为（49.86±2.90）%、（49.30±2.10）%，与理论值50%无显著性差异（P <0.05）。综上，研究建立的以TaqMan探针荧光定量PCR为基础的快速检测绵羊X、Y精子比率的方法速度快、检测所需精液体积小，准确性、稳定性及可靠性高，能够为绵羊X、Y精子分离检测提供技术支撑。
关键词：绵羊;;性控精液;;X、Y精子;;TaqMan探针;;荧光定量PCR
基金资助：新疆维吾尔自治区自然科学基金项目（2020D01A56）
