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中国草地学报2025年第07期:农杆菌介导的梭梭种子遗传转化体系初探

来源:期刊VIP网 时间:


作者:娜菲莎·木则帕尔;孙朗;王萍;任燕萍;马丽;程聪;姚正培;王波;张桦;

单位:新疆农业大学生命科学学院;新疆极端环境生物生态适应与进化重点实验室;

摘要:以梭梭种子为材料,在农杆菌种类、浓度、侵染时间优化条件后,进一步探索乙酰丁香酮(AS)、头孢霉素(Cef)、除草剂草铵膦(PPT)浓度对遗传转化的影响。结果表明:适合梭梭种子侵染的农杆菌菌株为GV3101,将带有伤口的梭梭种子在OD_(600)为0.6的菌液中侵染10 min,在MS+150μmol/L AS培养基中共培养2 d后,转移至含头孢霉素的抗性培养基(MS+250 mg/m L Cef)中延迟筛选10~14 d,再在含有草铵膦的抗性筛选培养基(MS+250 mg/m L Cef+1.0 mg/L PPT)经过21~28 d培养,得到抗PPT梭梭苗,利用PCR检测和GUS染色验证,获得转基因阳性植株,转化率为1.6%~5.2%。

关键词:梭梭种子;;农杆菌介导;;转化效率

基金资助:新疆维吾尔自治区自然科学基金重点项目(2022D01D35)