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作者：李康;王新宇;叶然;郭凌云;王林旭;许诺;张彤;段小涛;
单位：青岛大学药学院;军事医学研究院国家安全特需药品全国重点实验室;解放军总医院第一医学中心口腔科;
摘要：目的 探究9次跨膜超家族蛋白2(TM9SF2)缺失对水疱性口炎病毒(VSV)复制的影响，并探究其参与抗病毒先天免疫的作用机制。方法 采用转染小干扰RNA(siRNA)方法敲低人非小细胞肺癌细胞(A549)中TM9SF2基因；采用CCK-8法检测细胞增殖活性；建立VSV-绿色荧光蛋白(VSV-GFP)感染细胞模型；空斑实验检测病毒上清滴度；采用实时定量PCR和Western blot法检测VSV病毒感染A549细胞后病毒基因组复制的mRNA水平和蛋白水平表达情况，以及检测用双链RNA类似物聚胞苷酸[poly(I∶C)]刺激细胞后Ⅰ型干扰素信号通路中β干扰素(IFN-β)mRNA水平和干扰素调节因子3(IRF3)蛋白磷酸化水平。结果 与阴性对照组相比，TM9SF2敲低效果显著；敲低TM9SF2后不影响A549细胞增殖；成功建立VSV-GFP感染A549细胞模型；在病毒刺激下，敲低TM9SF2后细胞荧光强度减弱，显著下调VSV的mRNA水平和蛋白水平，VSV的病毒滴度降低；在poly(I∶C)刺激下，敲低TM9SF2显著上调IFN-β的mRNA水平和IRF3蛋白磷酸化水平。结论 TM9SF2缺失抑制VSV的复制，正向调控Ⅰ型干扰素信号通路，增强宿主抗病毒先天免疫反应。
关键词：9次跨膜超家族蛋白2(TM9SF2);;水疱性口炎病毒(VSV);;病毒复制;;抗病毒先天免疫
基金资助：国家自然科学基金(81673387)
