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作者：吕建春;郭紫婵;王亚珍;陈子嫣;张正祥;陈丽华;
单位：延安大学医学院;空军军医大学基础医学院免疫学教研室;
摘要：目的 采用Cre-loxP技术构建并鉴定自然杀伤(NK)细胞条件性Cd226基因敲除小鼠，进一步探索NK细胞表面CD226分子在缓解溃疡性结肠炎(UC)小鼠肠道炎症中的作用。方法 通过loxP标记的转基因小鼠以及天然细胞毒性受体1(Ncr1)-Cre工具鼠，依靠Cre-loxP系统构建NK细胞条件性Cd226基因敲除小鼠模型；采用PCR技术和琼脂糖凝胶电泳技术对小鼠基因型进行鉴定，用葡聚糖硫酸钠诱导构建Cd226基因敲除小鼠UC模型；流式细胞术检测NK细胞上CD226的表达水平以及相关免疫细胞在结肠组织的浸润水平；HE染色验证结肠组织炎症水平。结果 DNA凝胶电泳技术和流式细胞术证实NK细胞条件性Cd226基因敲除小鼠成功构建，NK细胞条件性敲除Cd226基因后，UC小鼠模型炎症状况缓解，流式细胞术结果显示外周血和结肠固有层中NK细胞比例降低，HE染色结果显示肠道炎症反应减轻。结论 NK细胞特异性敲除Cd226通过减少NK细胞数量及抑制其促炎功能缓解小鼠UC模型肠道炎症。
关键词：Cre-loxP;;CD226;;NK细胞;;基因敲除小鼠
基金资助：国家自然科学基金(82371748)
