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作者:王恺;王嫣;陈天琪;彭芳;周慧;史琴;
单位:贵州中医药大学基础医学院生理学教研室;
摘要:目的 探讨转染ROCK-siRNA对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的内皮细胞衰老及内皮细胞微粒(EMP)的影响。方法使用AngⅡ(1.0μmol/L)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)制备细胞衰老模型,并用ROCK干扰RNA(ROCK-siRNA)转染细胞,分为对照组、模型组、转染阴性对照组(AngⅡ联合NC-siRNA)、 ROCK-siRNA转染组(AngⅡ联合ROCK-siRNA)。采用SA-β-Gal法鉴定细胞衰老程度,流式细胞术检测培养液上清中EMP的数量及细胞内活性氧(ROS)水平,Western blot法检测各组细胞中沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)、 p53蛋白的表达。结果 ROCK-siRNA转染内皮细胞后,可明显减少AngⅡ诱导的衰老的内皮细胞数量,抑制衰老细胞释放CD31~+ EMP及ROS生成,同时可上调SIRT1蛋白表达、下调p53蛋白表达水平。结论 沉默ROCK可抑制EMP释放,减少ROS生成,调控SIRT1、 p53表达,延缓AngⅡ诱导的内皮细胞衰老。
关键词:内皮细胞微粒(EMP);;衰老;;ROCK;;血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)
基金资助:国家自然科学基金(82360789);; 贵州省卫健委项目(gzwkj2023-574)