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作者：聂阿真;倪子富;冯先阳;蔡萌萌;王欢;孙忠科;李成伟;
单位：河南工业大学生物工程学院;河南农业大学生命科学学院;
摘要：【目的】从醋糟中筛选具有耐酸和耐胆盐特性，并能够抑制致病菌生长并具备抗氧化活性的乳酸菌菌株，为益生菌资源的开发及其在食品、饲料等领域的应用提供依据。【方法】采用平板划线法从醋糟中分离乳酸菌菌株，根据耐酸（pH值2.5）和耐胆盐（质量分数0.3%）特性，初步筛选后进行16S rRNA基因鉴定。评估菌株的抑菌活性并分析抑菌成分，测定其自聚集和共聚集能力。通过抗生素敏感性、溶血性和生物胺产生试验评估菌株安全性。采用1,1-二苯基-2-苦基肼（1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）、2,2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐（2,2′-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt,ABTS）、羟自由基和超氧阴离子清除法测定筛选菌株的抗氧化能力。【结果】从醋糟中分离得到36株具有溶钙圈的菌株，其中，19株为革兰氏阳性菌，经过耐酸和耐胆盐筛选，N3、N9和N16菌株表现出较强耐受性。经分子生物学鉴定，N3为乳酸片球菌（Pediococcus acidilactici）,N9为植物乳杆菌（Lactiplantibacillus plantarum）,N16为内氏液体乳杆菌（Liquorilactobacillus nagelii）。对这3株菌株的生物学特性和安全性评价发现，N16对万古霉素、利福平、头孢曲松、阿莫西林、氯霉素、环丙沙星和四环素均表现出耐药性，并能够利用精氨酸产生生物胺，对宿主健康构成潜在风险。N3、N9菌株对金黄色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus）、鼠伤寒沙门氏菌（Salmonella typhimurium）、大肠杆菌（Escherichia coli）表现出显著的抑菌效果，经验证起抑菌作用的主要为发酵液中的有机酸。此外，N3、N9菌株还表现出优异的自聚集、共聚集能力和疏水性，对氨苄西林、氯霉素、头孢曲松、庆大霉素、克林霉素、阿莫西林、利福平、四环素均敏感或中度敏感，没有溶血性，不产生对宿主有害的生物胺。在抗氧化能力方面，N3和N9菌株能有效清除DPPH自由基、ABTS自由基、羟自由基和超氧阴离子。【结论】N3和N9菌株具有优良的生物学特性、安全性及抗氧化能力，作为益生菌在动物饲料添加剂和人类膳食补充剂等方面具有较大应用潜力。
关键词：醋糟;;乳酸菌;;益生菌;;生物学特性;;生物安全性;;抗氧化
基金资助：河南省重大科技专项(231100110300);; 河南省研究生教育改革与实践项目(2023SJGLX007Y)
