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作者:刘静雯;王文超;梁尧瑞;冯冰冰;张敏;宫金华;马克异;冯建彬;
单位:农业农村部淡水水产种质资源重点实验室,上海海洋大学;水产科学国家级实验教学示范中心,上海海洋大学;江苏省渔业技术推广中心;江苏鼎和水产科技发展有限公司;中国水产科学研究院东海水产研究所;
摘要:为探究罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)蜕皮激素受体(Ecdysone receptor, EcR)和蜕皮抑制激素(Molt-inhibiting hormone, MIH)对其幼虾蜕皮生长的影响,本研究构建了罗氏沼虾幼虾EcR和MIH基因RNAi技术体系,并将体外转录合成的dsEcR和dsMIH分别注射到罗氏沼虾幼虾体内,以研究短期干扰过程中靶标基因EcR和MIH基因沉默变化,以及长期干扰过程中罗氏沼虾幼虾的存活、生长以及蜕皮情况。结果显示:EcR基因的DNA结合域dsRNA的沉默效应最好,MIH基因的保守结构域dsRNA的沉默效应最好;EcR和MIH基因dsRNA干扰浓度为500 ng/μL、注射剂量为4μg/g时干扰效果最佳;注射干扰72 h内,罗氏沼虾幼虾鳃组织EcR、眼柄组织MIH基因的表达量均在48 h降至最低;在dsEcR长期干扰过程中,注射后第5 d时罗氏沼虾幼虾出现大量死亡,后期蜕皮数明显减少、蜕皮周期延长;在dsMIH长期干扰过程中,罗氏沼虾幼虾蜕皮数明显增加、蜕皮周期缩短、生长速度显著加快。由此可见,罗氏沼虾EcR基因促进了幼虾的蜕皮,MIH基因会抑制幼虾的蜕皮,在实际生产中可通过正向调控EcR基因和反向调控MIH基因的表达活性,调控罗氏沼虾幼虾的蜕皮周期而促进其生长,同时为深入解析罗氏沼虾幼虾的蜕皮生长调控机制提供了基础参考。
关键词:罗氏沼虾幼虾(Macrobrachium rosenbergii);;MIH与EcR;;基因干扰;;蜕皮生长
基金资助:江苏省种业振兴“揭榜挂帅”项目(JBGS[2021]121);; 江苏省重点研发计划(现代农业)项目(BE2022358)