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作者：张也;梁雯雯;霍晨超;史静华;齐祥珑;程凯;陆宇;徐建;
单位：首都医科大学附属北京胸科医院/北京市结核病胸部肿瘤研究所药学部;中国医学科学院医药生物技术研究所免疫生物学室;首都医科大学附属北京胸科医院/北京市结核病胸部肿瘤研究所药物学研究室;
摘要：目的:筛选治疗耐多药结核病核心药物——氯法齐明(clofazimine, CFZ)的增效剂，探究其联合增效CFZ抗结核活性的作用机制与抑制结核分枝杆菌MmpL5-MmpS5外排泵系统的关系。方法:选取Rv0678突变菌株Rv0678-M1(C305T)作为筛选菌株，通过微孔显色法进行CFZ增效剂的筛选；棋盘法测定珠氯噻醇与CFZ对不同浓度结核分枝杆菌的联合效果；分子对接预测珠氯噻醇和MmpL5及MmpL5-MmpS5之间的关系；表面等离子共振技术测定珠氯噻醇与MmpL5蛋白的相互作用；荧光法测定珠氯噻醇对Rv0678-M1菌体内溴化乙锭积累的影响。结果:1/8×MIC的珠氯噻醇能使Rv0678突变株对CFZ的最低抑菌浓度降至原来的1/16,逆转了Rv0678突变对CFZ产生的耐药性。珠氯噻醇和CFZ在结核分枝杆菌不同菌株上均有协同效应(FICI=0.25～0.375),在Rv0678突变株(FICI=0.25)、MmpL5-MmpS5过表达株(FICI=0.25)的协同活性优于H37Rv株(FICI=0.3125)及mmpS5敲除株(FICI=0.375)。珠氯噻醇与MmpL5有中等亲和力(Kd=3.075×10~(-4) mol),低于CFZ与MmpL5的亲和力(Kd=1.218×10~(-5) mol)。结论:珠氯噻醇显著增强CFZ的抗结核活性，可以通过抑制MmpL5-MmpS5的外排发挥联合增效作用。
关键词：分枝杆菌,结核;;珠氯噻醇;;氯法齐明;;分子作用机制
基金资助：高层次公共卫生技术人才建设项目(G2024-2-006);; 吴阶平医学基金会(2024-6-115)~~
