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分析试验室2025年第10期:高效液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中表没食子儿茶素没食子酸酯

来源:期刊VIP网 时间:


作者:王祥艳;张寅静;唐晓荞;樊柏林;

单位:湖北省疾病预防控制中心,国家卫生健康委员会食品安全风险评估与标准研制特色实验室;

摘要:建立了超高效液相串联质谱(UPLC-MS/MS)测定大鼠血浆中表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的方法,研究了不同剂量下EGCG在体内的毒代动力学特征。在血浆样品中加入等体积10 mg/mL抗坏血酸作为稳定剂,用乙腈溶液蛋白沉淀处理,以甲苯磺丁脲为内标,流动相为0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈溶液,梯度洗脱,BEH-C18色谱柱(2.1 mm×50 mm, 1.7μm)分离。电喷雾(ESI)负离子源,多反应监测模式(MRM)检测,EGCG和内标的离子对分别为m/z 456.94→m/z 168.93和m/z 268.99→m/z 169.94。结果表明,EGCG在10~10000 ng/mL范围内表现出良好的线性关系(r~2>0.9968),批内和批间相对标准偏差在1.5%~8.6%之间,批内和批间准确度在101.4%~111.2%之间;EGCG的回收率在98.9%~102.2%之间,内标的回收率在103.8%~104.6%之间,基质因子为96.3%~96.8%。在各条件下放置后,与其理论浓度的偏差均在±15%以内,稳定性良好。大鼠灌胃低、中、高3个剂量的EGCG后,低、中、高剂量组雄性动物的毒代动力学参数结果为:峰浓度(C_(max))分别为(4.71±1.91),(20.51±20.75)和(18.03±15.38)μg/mL,达峰时间(T_(max))分别为(0.31±0.13),(0.81±0.38)和(1.38±0.75) h,血药浓度时间曲线下面积(AUC_(0-t))分别为(4.55±0.50),(42.05±34.83)和(76.08±70.96)(h·μg)/mL;低、中、高剂量组雌性的毒代动力学参数结果为:C_(max)分别为(0.44±0.36),(3.52±2.44)和(17.67±10.65)μg/mL, T_(max)分别为(1.75±2.84),(0.69±0.38)和(2.81±2.67) h, AUC_(0-t)分别为(0.99±0.43),(9.14±5.77)和(73.25±21.68)(h·μg)/mL。本文建立的UPLC-MS/MS测定大鼠血浆中EGCG浓度的方法,可用于其毒代动力学研究。

关键词:表没食子儿茶素没食子酸酯;;超高效液相串联质谱;;大鼠血浆;;毒代动力学

基金资助:国家重点研发计划(2023YFF1104804);; 湖北省公共卫生领军人才项目(鄂卫通2021年73号)资助