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作者：湛钊;刘学政;董豆豆;陈定宇;孙亚凌;
单位：长江大学附属第一医院检验科;福建医科大学基础医学院;空军军医大学唐都医院实验外科;华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科;长江大学附属第一医院泌尿外科;
摘要：目的 本研究旨在明确肝癌细胞系Hepa1-6细胞分泌的微囊泡(MP)的特性和表征，研究Hepa-1-6细胞分泌的MP(Hepa1-6-MP)对树突状细胞(DC)的刺激作用和进入DC的途径，并探索Hepa1-6-MP刺激的DC所诱导的CD8~+ T细胞对肝癌细胞的特异性杀伤作用，试图开发一种新型的抗肝癌免疫治疗模式。方法 通过Western blot实验、透射电子显微镜(TEM)和动态光散射(DLS)实验对所提取的Hepa1-6-MP进行检测与鉴定。流式细胞术检测DC摄取MP抗原的途径与方式。ELISA检测负载Hepa1-6-MP的DC对CD8~+ T细胞上清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和γ干扰素(IFN-γ)释放水平的影响。乳酸脱氢酶(LDH)实验检测负载Hepa1-6-MP的DC所刺激的CD8~+ T细胞对肝癌细胞的杀伤作用。结果 Hepa1-6-MP经鉴定后其形态、大小和标志物符合要求。Hepa1-6-MP可增加DC成熟标志物CD80和CD86的表达，并以网格蛋白介导的内吞途径和吞噬途径被DC摄取，然后刺激CD8~+ T细胞释放了高水平的TNF-α和IFN-γ,并诱导CD8~+ T细胞特异性杀伤肝癌细胞。结论 提示负载MP的DC疫苗可能是未来一种很有前景的肝癌治疗工具。
关键词：树突状细胞(DC);;肝细胞癌(HCC);;微囊泡(MP);;CD8~+ T细胞;;肿瘤免疫
基金资助：福建医科大学启航基金研究生创新项目(2021QH2002)
