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作者：卢叶;朱昱蓉;陈盛霞;
单位：宜兴市人民医院检验科;江苏大学医学院;临汾市中心医院微生物实验室;
摘要：目的 探讨Ras同源基因家族成员A(RhoA)对单增李斯特菌(Lm)感染RAW264.7小鼠巨噬细胞炎性反应、迁移的调控作用。方法 采用小干扰RNA(si-RhoA)抑制RAW264.7细胞RhoA表达，Lm以感染复数(MOI)=10感染转染了si-RhoA 48 h的RAW264.7细胞。吞噬实验检测RAW264.7细胞吞噬细菌的能力；Transwell~(TM)迁移实验检测RAW264.7细胞迁移能力；实时荧光定量PCR检测RAW264.7细胞白细胞介素1β(IL-1β)、 IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、 IL-10的mRNA表达；ELISA检测细胞上清IL-1β、 IL-6、 TNF-α、 IL-10的含量；Western blot法检测Rho相关蛋白激酶1/2(ROCK1/2)蛋白的表达。结果 敲低RhoA可使Lm感染的RAW264.7细胞的迁移能力降低，抑制IL-1β和IL-6 mRNA和蛋白的表达，对TNF-α和IL-10的表达无明显影响；同时RAW264.7细胞ROCK2蛋白表达显著减少，ROCK1蛋白表达无差异。结论 干扰RhoA阻断ROCK2信号通路抑制Lm感染RAW264.7细胞炎性反应和迁移能力，靶向RhoA/ROCK2信号通路可能成为抗Lm感染的新策略。
关键词：炎性反应;;单增李斯特菌(Lm);;RAW264.7细胞;;Ras同源基因家族成员A(RhoA)
基金资助：科技部基础平台资助项目(2019-194-30)
