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作者：杨肖念;邹多宏;
单位：安徽医科大学口腔医学院,安徽医科大学附属口腔医院,安徽省口腔疾病研究重点实验室;上海交通大学医学院附属第九人民医院,上海交通大学口腔医学院,上海市口腔医学重点实验室;
摘要：目的 制备负载单宁酸的双层壳聚糖膜(CS@TA),测试其活性氧(ROS)清除能力、生物相容性及抗菌性能，研究其作为引导骨再生屏障膜的可行性。方法 采用自蒸发技术先制备出致密的单层壳聚糖(CS)膜，随后采用蒸发干燥、取向冷冻和冷冻干燥技术在单层CS膜上制备出多孔的CS层，从而得到双层CS膜，利用扫描电镜观察其微观结构。将制备好的CS双层膜先接枝4-羧基苯硼酸形成中间体，按不同比例接枝单宁酸(TA),使用傅里叶红外光谱仪(FITR)分析TA与CS双层膜的相互作用。通过1,1-二苯基-2苦基肼(DPPH)测试ROS清除能力，选取负载TA后ROS清除效率在90%以上的双层膜进行后续体外细胞实验，利用CCK-8及活死细胞染色测试其生物相容性，利用扫描电镜观察MC3T3-E1细胞在双层膜多孔面上的黏附情况，通过菌落计数测试其对金黄色葡萄球菌(E.coli)和大肠埃希菌(S.aureus)的抗菌性能。结果 CS@TA双层膜一面光滑致密，另一面粗糙疏松多孔，截面呈垂直薄膜方向的有序多孔结构，随着TA的加入，双层膜的ROS清除能力先迅速增加后缓慢稳定，CCK-8及活死细胞染色结果显示加入过多的TA会明显影响双层膜的生物相容性，细菌稀释涂板计数结果显示加入适量TA的双层膜与未负载TA的双层膜相比，对E.coli和S.aureus具有一定抗菌能力。结论 负载适量TA的双层膜具有较强的ROS清除能力，良好的生物学性能，且对E.coli和S.aureus均具有一定的抗菌能力。
关键词：单宁酸;壳聚糖;活性氧;抗菌;屏障膜;取向冷冻
基金资助：国家自然科学基金(编号：32171347)
