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作者:胡爽;陈晓冉;冯钰斌;
单位:安徽医科大学药学院;安徽中医药大学药学院;中国科学技术大学附属第一医院(安徽省立医院)药学部,精准药物制剂与临床药学安徽省重点实验室;
摘要:目的 探讨DDX5解螺旋酶对白血病细胞系K562细胞增殖、凋亡和分化的影响。方法 利用癌症基因数据库GEPIA中的数据分析DDX5 mRNA在白血病患者组织中的表达;生存曲线分析DDX5 mRNA表达水平与白血病患者预后关系;采用小干扰RNA(siRNA)瞬时转染K562细胞以敲低DDX5;使用实时荧光定量(RT-PCR)检测沉默效果;采用Western blot检测蛋白表达水平;采用CCK-8实验检查细胞增殖能力、采用Western blot和免疫荧光检测细胞增殖相关蛋白的表达水平;采用流式细胞术检测细胞凋亡;采用流式细胞术和Western blot检测细胞分化相关蛋白的表达水平。最后,通过RT-PCR和Western blot检测沉默DDX5对P21和P53蛋白表达水平的影响。结果 GEPIA数据库分析结果显示DDX5在人白血病骨髓组织中的表达水平显著高于健康人群,低表达DDX5的患者具有更长的生存期。体外实验表明敲低DDX5可显著抑制K562细胞的增殖,流式细胞术检测结果表明可以促进细胞凋亡、促进CD11b和CD14蛋白的表达诱导细胞分化。沉默DDX5促进P21和P53蛋白的表达水平。结论 DDX5可能通过靶向P53抑制白血病细胞系K562细胞增殖,促进凋亡诱导分化。
关键词:K562细胞;DDX5;细胞增殖;凋亡;细胞分化;P53
基金资助:国家自然科学基金(编号:82300177); 安徽省重点研究与开发计划(编号:2022e07020010)~~