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作者:肖艳松;李思军;吴文信;刘天波;周向平;周陆苏;钟杰;
单位:湖南省烟草公司郴州市公司;湖南省烟草科学研究所;湖南省烟草公司永州市公司;湖南农业大学植物保护学院;
摘要:为快速有效检测烟草靶斑病菌,以烟草靶斑病菌beta-tubulin基因序列保守区域为靶标位点,设计重组酶介导扩增技术(Recombinase aided amplification,RAA)引物,结合侧流层析试纸条(Lateral flow dipstick,LFD),建立烟草靶斑病菌快速检测体系并进行优化。结果表明,LFD-RAA检测体系在39℃恒温条件下反应30 min即可完成RAA扩增,并具有较高的特异性,其检测极限值为100 fg/μL,与PCR检测灵敏度相当。对检测体系优化确定检测扩增的最优时间为20~35 min、扩增温度为31~39℃。LFD-RAA检测体系可应用于烟草上烟草靶斑病菌的快速检测。
关键词:烟草靶斑病;重组酶介导扩增技术;检测
基金资助:湖南省郴州市烟草公司烟草农业科技创新项目“郴州烟区烟草靶斑病和野火病病原微生物组解析及早期流行诊断”(CZYC2022JS03)、“郴州雪茄烟霉变机制与绿色防控技术研究”(CZYC2023JS05); 中国烟草总公司湖南省公司科技重点项目“湖南烟草靶斑病成灾机制与绿色防控技术研究”(HN2021KJ01)