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作者:玉洁莹;黄琳;徐伟强;韦云依;王一兵;程淑;蔡佳;刘政昭;陈福彩;李鹏飞;
单位:广西科学院,广西海洋科学院,广西水产生物技术与现代生态养殖重点实验室,广西渔业重大疫病防控与高效健康养殖产业技术工程研究中心;南宁学院食品与质量工程学院;广西民族大学,海洋与生物技术学院;广东海洋大学水产学院,广东省水产动物病害防控与健康养殖重点实验室;东兴市渔业技术推广站;
摘要:【目的】探究五倍子(Galla chinensis)醇提物在石斑鱼(Epinephelus spp.)虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus,SGIV)感染中的抗病毒效果及作用机制,为开发抗SGIV药物提供参考。【方法】通过测定细胞活力、观察细胞骨架等方法确定五倍子醇提物对石斑鱼脾脏组织细胞系(Grouper spleen cells,GS)的安全浓度,利用结晶紫染色和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)等方法评估五倍子醇提物在细胞水平上对SGIV的抗病毒效果,进一步通过石斑鱼活体试验验证五倍子醇提物的抗SGIV效果。结合RT-qPCR和流式细胞仪的结果,分析五倍子醇提物的抗SGIV机制。【结果】当五倍子醇提物质量浓度≤12.5μg/mL时对GS细胞无显著毒性,GS细胞形态无异常。12.5、6.25、3.125μg/mL的五倍子醇提物均可降低SGIV的感染力,抗病毒效果呈现剂量依赖性。饲料中添加五倍子醇提物可使石斑鱼感染SGIV后肝脏组织内主要衣壳蛋白基因(mcp)的相对表达量显著下降(P <0.01)。五倍子醇提物可与SGIV病毒粒子相互作用,使mcp和囊膜蛋白基因(vp19)的相对表达量显著降低(P <0.01),病毒滴度显著下降(P <0.05);五倍子醇提物还可干扰SGIV感染细胞过程中的吸附、侵入和复制,药物组细胞中SGIV mcp和vp19基因的相对表达量显著降低(P <0.01)。【结论】五倍子醇提物对SGIV具有良好的体外和体内抗病毒效果,在SGIV侵染宿主细胞的吸附、侵入和复制阶段中起到干扰作用,有抗SGIV感染作用,具有成为安全、高效的抗SGIV新型渔用药物的潜力。
关键词:石斑鱼虹彩病毒(SGIV);;五倍子;;抗病毒机制;;渔用药物
基金资助:国家自然科学基金(32373175);; 广西自然科学基金(2024GXNSFFA010017,2022GXNSFBA035521,2022JJA130074);; 国家重点研发计划(2022YFD2401200);; 国家现代农业产业技术体系广西创新团队项目(nycytxgxcxtd-2021-08-02)