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作者：何小艳;吴浩文;胡慧琴;郭金玲;马东旭;李沛;熊建;李库;龚大春;
单位：三峡大学生物与制药学院;湖北省生物酵素工程技术研究中心;安琪酵母股份有限公司;
摘要：以黑曲霉LH为出发菌株，经常压室温等离子体(ARTP)高通量筛选获得诱变菌株，并对其摇瓶和5 L发酵罐的发酵工艺进行了优化。结果表明，建立了48孔板微量组织研磨破碎与考马斯亮蓝法相结合的高通量检测方法，正突变率达到81%;经摇瓶复筛，得到诱变菌株Q270-C6,其蛋白含量为41%,比出发菌株提高了10.3%,传代7次仍具有良好的遗传稳定性；在葡萄糖浓度为26.65 g·L~(-1)、酵母浸粉浓度为3.61 g·L~(-1)、蛋白胨浓度为6.65 g·L~(-1)、KH_2PO_4浓度为1.36 g·L~(-1)、接种量为10%、发酵温度为28℃、搅拌转速为400 r·min~(-1)、采用溶氧反馈补料方式的最佳工艺条件下，菌株Q270-C6在5 L发酵罐中菌体干重为14.3 g·L~(-1),蛋白含量达到40.5%,为黑曲霉发酵产蛋白中试放大提供了科学依据。
关键词：菌体蛋白;黑曲霉;ARTP;高通量筛选;发酵工艺
基金资助：国家重点研究计划项目(2021YFC2100300); 湖北省自然科学基金联合基金项目(2024AFD122)
