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作者：孙浩峰;刘健仪;张琦;焦慧;周敏;宋德伟;
单位：南京理工大学化学与化工学院;中国计量科学研究院化学计量与分析科学研究所;
摘要：C-反应蛋白（CRP）是一种重要的急性时相反应蛋白，广泛用于炎症和心血管疾病风险的评估，同时也作为致病因子直接参与某些疾病的致病过程，因此，针对CRP靶点开发免疫抑制剂或进行致病机理的探究具有重要意义。B细胞表位绝大部分为构象表位，而构象表位的研究通常具有挑战性，目前尚未见关于CRP在溶液中的构象表位映射方法研究的报道。本研究使用氢氘交换质谱法（HDX-MS）结合B细胞表位的多参数预测及蛋白质二级结构分析建立了一种快速构象表位研究策略，并成功应用于分子量为115 kDa的完整五聚体CRP和用于临床诊断的单克隆抗体（mAb）5A8的结合位点和变构靶点分析。研究结果表明，氨基酸残基84～103、138～146和165～173这3个区域共同构成了mAb 5A8在CRP上的潜在构象表位，同时发现氨基酸残基21～32和175～178区域为潜在的变构靶点。mAb 5A8结合位点及变构靶点的发现对临床诊断具有重要的参考意义。实验结果表明，此流程可以在接近生理状态下对CRP进行构象表位映射，具有快速、灵敏和高通量等优点。
关键词：C-反应蛋白;;氢氘交换;;表位作图;;构象表位;;变构靶点
基金资助：国家重点研发计划项目（No.2022YFF0710301）;; 中国计量科学研究院基本科研业务费项目（No.AKYZD2115-1）资助~~
