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作者:陈昕;戴习林;贾垂攀;董汪茗;何薄;罗振辉;步晓阳;
单位:上海海洋大学水产与生命学院;上海市水产研究所;
摘要:为了探究罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)ATP合酶寡霉素敏感相关蛋白(OSCP)亚基基因在ATP合酶结构完整性和功能稳定性中的作用,采用RACE技术克隆获得OSCP亚基cDNA全长,利用siRNA成功抑制OSCP亚基基因在心脏中的表达,并进行了ATP合酶其他亚基基因表达量的变化研究。结果表明:罗氏沼虾ATP合酶OSCP亚基基因cDNA全长922 bp,编码209个氨基酸,为疏水性蛋白;一致性对比和进化关系分析表明,罗氏沼虾OSCP亚基基因与美国龙虾一致性最高、亲缘关系最近;组织定量PCR结果显示,OSCP亚基基因表达量在罗氏沼虾心脏组织中最高;利用siRNA对罗氏沼虾OSCP亚基基因表达进行抑制,有效siRNA的最适注射剂量为1.2μg/g,当罗氏沼虾心脏中OSCP亚基基因的表达下调时,ATP合酶α、β、γ、δ、b和d亚基基因表达量出现显著下调(P<0.05)。研究表明,OSCP亚基基因的表达受到抑制时,会影响ATP合酶其他亚基的基因表达,进而影响ATP合酶的合成。
关键词:罗氏沼虾;;ATP合酶;;基因克隆;;OSCP;;siRNA
基金资助:上海市科技兴农重点攻关项目(G2021-02-08-00-12-F00748)