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作者:朱芷琳;高风英;董浚键;孙成飞;张赫桐;李佳鑫;王庆奎;
单位:天津农学院水产学院;中国水产科学研究院珠江水产研究所,农业农村部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室;
摘要:为探索大口黑鲈(Micropterus salmoides)雌激素受体esr2a与esr2b基因的潜在免疫功能和作用机制,克隆了大口黑鲈esr2a与esr2b基因的cDNA片段,分析了其序列特征、表达模式、对注射诺卡氏菌(Nocardia seriolae)、大口黑鲈蛙虹彩病毒(largemouth bass virus, LMBV)及聚胞肌酸Poly I:C的时序性表达及对外源性激素17β-雌二醇(E_2)处理的响应。结果表明:获得的esr2a基因cDNA序列长度为1 912 bp,其中3′-非编码区(UTR)为113 bp, 5′UTR为125 bp,开放阅读框为1 674 bp,共编码557个氨基酸;克隆获得的esr2b基因cDNA序列长度为2 358 bp,其中3′UTR为293 bp, 5′UTR为52 bp,开放阅读框为2 013 bp,共编码670个氨基酸;大口黑鲈esr2a与esr2b蛋白均是一种稳定性较差、亲水性较强的酸性蛋白;它们均具有1个ZnF_C4结构域和1个HOLI结构域;通过荧光定量PCR(real time quantitative PCR,RT-qPCR)分析发现,在正常鱼体中,esr2a基因在肾中显著高表达,esr2b基因在脾和肝中显著高表达,通过体内注射诺卡氏菌后,发现可以引起esr2a与esr2b基因在大口黑鲈肝表达量显著下降(P<0.05);注射LMBV后,esr2a与esr2b基因在肾中的表达量显著提高(P<0.05);而注射Poly I:C后,其可显著抑制esr2a与esr2b在肾与脾的表达(P<0.05);此外,E_2处理均能抑制esr2a与esr2b基因在雌雄鱼中脾的表达(P<0.05)。研究表明,esr2a与esr2b基因可能与大口黑鲈免疫反应相关。
关键词:大口黑鲈;;雌激素受体;;生物信息学分析;;表达特征
基金资助:中国水产科学研究院基本科研业务费资助(2023TD95);; 财政部和农业农村部:国家现代农业产业技术体系资助(CARS-46)