来源：期刊VIP网 时间：
作者：焦心皓;周雪敏;沈振宇;许韬;王禄来;吴萍;
单位：江苏科技大学生物技术学院;
摘要：家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus, BmNPV)是家蚕的重要病原微生物之一，其引发的病毒病会导致家蚕大量死亡，严重威胁蚕桑产业的高质量发展。近年来，基于CRISPR/Cas12a的分子诊断技术因其高灵敏度、高特异性和操作简便等优势而受到广泛关注。针对BmNPV的ie-1基因，设计并筛选了多条crRNA,通过优化crRNA组合，成功建立了一种新型的CRISPR/Cas12a系统多重crRNA检测方法。研究结果表明，crRNA3、crRNA8和crRNA9组合使用时检测效果最佳，30 min内通过肉眼观察荧光可在感染BmNPV 24 h的家蚕中肠组织及感染48 h的血液和丝腺组织中检测出BmNPV。该方法无需复杂的核酸扩增步骤，即可实现对BmNPV的快速可视化检测。
关键词：BmNPV;;CRISPR/Cas12a系统;;快速检测;;多重crRNA组合
基金资助：江苏省重点研发计划项目(BE2022355);; 国家自然科学基金项目(32372948)
